دوره آموزشی Real-time PCR
امروزه تکنیکهای تشخیص و تکثیر اسیدهای نوکلئیک از ابزارهای بسیار ارزشمند در پژوهشهای بیولوژیک به شمار میروند. پژوهشگران از این روشها در دامنهی گستردهای از کاربردها در همه زمینههای علوم زیستی از جمله پژوهشهای پایه، بیوتکنولوژی، پزشکی، تشخیصی و … استفاده میکنند. در برخی از کاربردها، تشخیص کمّی (qualitative) اسیدهای نوکلئیک کافی است، اما در برخی کاربردهای دیگر نیاز به تشخیص کیفی (quantitative) اسیدهای نوکلئیک میباشد. در این زمینه ریل تایم پی سیآر (Real-time PCR) را میتوان هم برای آنالیز کمّی و هم آنالیز کیفی اسیدهای نوکلئیک استفاده کرد. انتخاب بهترین روش برای استفاده نیاز به کسب دانش کافی از این تکنولوژی دارد. در دوره جامع Real-time PCR شما با مبانی، کاربردها، اجرا، آنالیز و خطایابی این تکنولوژی آشنا خواهید شد و تسلط و مهارت خوبی در به کارگیری این تکنیک در پژوهشها و مسیر علمی خود پیدا خواهید کرد.
فهرست عناوین ارایه شده دوره
- مقدمهای بر qPCR/Real-time PCR و تفاوت آن با PCR
- Real time PCR چگونه کار میکند؟
- تشخیص با رنگ یا پروب: رنگهای متصلشونده به DNA و مبتنی بر پروب و پرایمر فلورسنت
- مراحل و اجزای Real time PCR
- ارزیابی دادهها
- پردازش داده
- ارزیابی منحنیها، Ct و آستانه
- طراحی پرایمر و پروب و نرمافزارهای مربوطه
- بهینهسازی پروتوکلهای Real-time PCR
- روشهای مختلف نرمالسازی (normalization)
- روشهای کمّیسازی (absolute و relative)
- اعتبارسنجی (validation)، برآورد دقت و کارایی
- مروری بر روشهای استخراج اسیدهای نوکلئیک وآمادهسازی نمونه
- RT-PCR
- جلوگیری از آلودگی
- طرح آزمایش: Multiplex و Singleplex
- آنالیز بیان ژن
- کنترلهای داخلی(internal controls) و ژنهای رفرانس (reference genes)
- کالیبراسیون
- نکات مهم و کاربردی هنگام انجام ریل تایم پیسیآر
با آکادمیقاصدک، گام به گام رشد کنید و دانش تئوری و کاربردی خود را همزمان گسترش دهید.
6 ساعت و 45 دقیقه آموزش مفید
یادگیری آنلاین و امکان مرور دوباره
دسترسی به منابع دوره
این دوره به چه کسانی توصیه میشود؟
- دانشجویان و محققان ژنتیک، بیوتکنولوژی، زیستسلولیمولکولی، زیستگیاهی، زیستجانوری، پزشکی، کشاورزی، میکروبیولوژی، بیوشیمی، علوم آزمایشگاهی و بیوانفورماتیک
- این دوره برای هر زیستشناس مولکولی مدرن با هدف آشنایی و تسلط بر مفاهیم و مبانی انجام ریل تایم پیسیآر در تمام حوزههای دانش سلولیمولکولی و ژنومیکس مفید است.
- فارغالتحصیلان یا کارشناسان آزمایشگاه که در زمینههای آنالیز ژنتیکی و تشخیص بیماریها فعالیت میکنند.
آنچه شما یاد خواهید گرفت:
- مبانی و مفاهیم ریل تایم پیسیآر، شناخت ویژگیهای مهم پرایمر و پروب
- طراحی پرایمر و پروب به کمک نرمافزار
- اجزای ریل تایم پیسیآر و شناخت مراحل و انجام ریل تایم پیسیآر
- خطایابی
- ارزیابی و پردازش دادهها
- برآورد دقت و کارایی
پرسشهای متداول دانشجویان
- پیشنیاز، علاقه و انگیزه شما به همراه دسترسی به سرعت مطلوب اینترنت.
- دوره آموزشی طراحی پرایمر و پیسیآر
دسترسی به ویدیوها دست کم سه ماه هست. آکادمی قاصدک دسترسی را محدود نخواهد کرد و شما بیش از این مدت و شاید برای بیش از یک سال دسترسی به دوره داشته باشید. احتیاط ما برای شرایط بین المللی غیرقابل پیش بینی است.
hajar505پژوهشگر
با سلام . در قسمت طراحی پرایمر و در نظر گرفتن G/C clamp اضافه کردن یک یا سه تا از این نوکلئوتیدها در انتهای 3 پرایمر چه نقشی را ایفا می کند ؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
در طراحی پرایمرهای PCR (Polymerase Chain Reaction)، استفاده از G/C clamp به عنوان یک استراتژی مهم است که برای افزایش اثربخشی و دقت آمپلیفیکاسیون استفاده میشود. G/C clamp یا گریپ کلمپ، یک الگوی ساختاری است که با اضافه کردن تعداد معینی از نوکلئوتیدهای دارای پیوندهای هیدروژنی گوانین-سیتوزین (G-C) در انتهای 3′ پرایمرها به کنترل آمپلیفیکاسیون کمک میکند.
نقش G/C clamp در پرایمرهای PCR شامل چندین جنبه است:
پایداری پرایمر: نوکلئوتیدهای دارای پیوندهای G-C به عنوان G/C clamp در انتهای 3′ پرایمر، پایداری پرایمر را افزایش میدهند. این پیوندهای پایداری بیشتری ایجاد میکنند که از تجزیه پرایمر در طی روند آمپلیفیکاسیون جلوگیری میکند.
انتخاب هدف مورد نظر: اضافه کردن G/C clamp به پرایمرها میتواند کمک کند تا پرایمر به صورت انتخابی تری به هدف مورد نظر بایند و تعداد ممکنی از آمپلیکونهای غیر اصلی را کاهش دهد. این کاهش تعداد آمپلیکونهای غیر اصلی میتواند دقت و اختصاصیت را بهبود بخشیده و از تولید محصولات غیر مطلوب PCR جلوگیری کند.
کنترل دمای آنیلینگ: پیوندهای G-C به عنوان G/C clamp باعث افزایش دمای آنیلینگ پرایمر میشوند. این موضوع باعث میشود که پرایمر به صورت مطمئنتری به محصول هدف متصل شود و اثر آمپلیفیکاسیون بهبود یابد.
به طور کلی، استفاده از G/C clamp به عنوان یک راه حل موثر برای بهبود کارآیی و اختصاصیت PCR استفاده میشود و این راهکار به دلیل ویژگیهای پایداری و افزایش دمای آنیلینگ مورد توجه قرار میگیرد.
سیده دریا ساجدیپژوهشگر
با سلام خدمت همکاران آکادمی قاصدک
خواستم از همین جا تشکر کنم از همتون بابت دوره های خوب و تدریس عالیتون و همچنین مرسی که این پلت فرم رو درست کردین. بعد از اتمام 3 دوره ی پایه همزمان، هم علاقه مندتر شدم و هم مشتاق تر برای یادگیری. امیدوارم در تمام مراحل زندگیتون شاد و سربلند باشید.
قاصدک(پشتیبان علمی)
پیروز باشید و سپاس از ارایه نظر ارزشمندتان.
فریباپژوهشگر
سلام وقت شما بخیر
واقعا دوره های شما بینظیره. من چهار دوره از شما تهیه کردم. اگر امکانش هست این دوره رو هم تخفیف بذارید تا بتونیم استفاده کنیم.
ممنون از شما
bradrbkayylyپژوهشگر
سلام وقت بخیر من این دوره رو تهیه کردم. الان متوجه شدم دوره طراحی پرایمر و PCR هم دارید. به نظرتون اول این دوره ریل تایم رو ببینم بعد طراحی پرایمر یا برعکس؟؟؟
naseri1372پژوهشگر
خیلی عالی بود
به همه توصیه می کنم
ممنون از شما
فقط قسمت هایی از ویدیو نویز داره اگه بتونین نویزشو بگیرین عالیه
هانیه
سلام وقت شما بخیر.
من دانشجوی ترم سوم زیست سلولی مولکولی هستم و شناختی از Real time PCR ندارم و فقط اسمش به گوشم خورده. میتونم از این دوره استفاده کنم یا نیاز به پیشزمینه دارم؟
پیشاپیش ممنونم از پاسخگویی.
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود بر شما.
چنانچه با PCR معمولی و مراحل آن آشنا باشید و کمی دانش ژنتیک پایه داشته باشید می توانید از این دوره استفاده نمایید.
reyhaneh.mohamadi4321پژوهشگر
با سلام این دوره فوق العاده بود خ خوشحالم ک این دوره رو گذروندم و از شما بسیار متشکرم و خسته نباشید میگم.
این دوره تمام علامت سوال های ذهنم رو پاک کرد!
سپاس بی کران
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود بر شما
از رضایت شما خرسندیم.
سمیرا
سلام. وقت بخیر
آیا این دوره مستقل از pcr و طراحی پرایمر هست یا میبایست اول آن دوره گذرانده شود؟ چون تجربه ای کلا در زمینه ی انجام pcr ندارم ولی کارم با ریل تایم هست.
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود بر شما. بهتر است که در کنار ریل تایم، طراحی پرایمر پایه را نیز یاد بگیرید.
مصطفی پپژوهشگر
عرض سلام و ادب
پس از خرید این محصول، تا چه مدت به ویدیوهای مجموعه دسترسی داریم؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود بر شما.
لطفا راهنمای سایت را مشاهده نمایید.
لیلا (خریدار دوره)
سلام
خداقوت. عاااالی بود محتوای دوره. حتی برای کسی که هیچ آشنایی با این تکنیک ندارد کاملا کاربردی و مفید هست. لذت بردم واقعا. کاش امکانش بود از تجربیات شما بیشتر استفاده میکردم. و چقدر حیف که ستاره هایی مثل شما باید از این مرز و بوم دور باشند.
قاصدک(پشتیبان علمی)
قدردان همراهی شما هستیم و تلاش میکنیم که صادقانه به شما کمک کنیم که در رشته خودتون بدرخشید.
leila.manafi11پژوهشگر
سلام
خدا قوت. عالی بود محتوای دوره؛ برای منی که فقط اسم ریل تایم بگوشم خورده بود واقعا خیلی کاربردی و مفید بود.
قاصدک(پشتیبان علمی)
خوشحالیم که این دوره براتون مفید بوده و براتون بهترین آرزوها رو داریم.
سما امین رفتاریپژوهشگر
سلام واقعا ممنونم بابت این دوره آموزنده و کامل موفقیت روزافزون برای آکادمی قاصدک آرزومندم.
یه سوالی داشتم در مورد قسمت طراحی پرایمر برای qPCR : اگر اشتباه نکنم فرمودین انتخاب الیگونوکلئوتیدها از قسمتی باید باشه که کمترین تعداد واریانت ها در الاینمنت رو داشته باشه اما مثالی که کار شد از قسمتی بود که به نسبت بقیه قسمت های ژن تعداد واریانت های بیشتری داشت (نقاط رنگی) در حالی که قسمت های کانزرو زیادی بالاتر وجود داشت. علت این انتخاب چی بود؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
سلام و درود و ممنون از تماس شما. توجه کنید که در انتخاب مثالها و روش حل ما همیشه پرچالشترین موقعیت رو انتخاب میکنیم در اون قسمت بخاطر هدف آموزش پرایمرهای دیجنریت و در نظر گرفتن حالت فرضی که هیچ راه انتخابی نداریم اینطور طراحی رو انجام شد. موفق باشید.
نازنینپژوهشگر
سلام وقت بخیر
پایان این دوره گواهی هم داده میشه ؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود بر شما. این دوره بسیار عالی و پرطرفدار بوده است و برای پایین نگهداشتن هزینه، برای این دوره سرتیفیکیت صادر نمی شود.
فائزه رمضانیپژوهشگر
سلام ببخشید برای این دوره گواهی صادر نمیشه؟؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود بر شما.
گواهی تکمیل دوره برای دوره های مدلینگ ساختار پروتئین، دوره جامع بیوانفورماتیک کاربردی، بیان و خالصسازی پروتئینهای نوترکیب در سیستم میکروبی و تکنولوژی ویرایش ژنوم با CRISPR/Cas9 صادر می شود که در توضیحات دوره و بنر دوره ها به آن اشاره شده است.
پیروز باشید
shadirahimii99پژوهشگر
سلام وقتتون بخیر و خیلی ممنون بابت زحماتتون.
دوتا سوال داشتم اول اینکه فایل پی دی اف مطالب به صورت رنگی قابل دریافت نیست؟ و دوم هم اینکه این دوره گواهی نداره یا میتونیم درخواست بدیم برای گواهیش؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود.
فایل پی دی اف قابل دانلودشدن است و لینک درخواست گواهی هم در پایان جلسات دوره در دسترس است.
shadirastad69
سلام وقتتون بخیر. خیلی ممنون از مانلی عزیز و همه عزیزانی که در تشکیل این کلاس ها همکاری میکنند. من یه خواهش و درخواستی داشتم ازتون من تمام دوره هاتون رو ثبت نام و شرکت کردم اما این دوره و دوره pcr چون در پلتفرم قدیمی ثبت نام شده بود من دسترسی ندارم که بتونم دروس رو دوره کنم. میخواستم اگر ممکنه باشه دسترسی ما رو هم باز کنید تا بتونیم دوره و رفع اشکال کنیم.
خیلی ممنون
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود
لطفا از طریق صفحه تماس با ما با آکادمی تماس بگیرید.
پیروز باشید
Nastaran Hematiپژوهشگر
سلام ، خیلی خوشحالم که که این دوره رو شرکت کردم امروز ی بار دیگه مرور کردم من تز پایان نامم تکنیک ریل تایم داشت طراحی پرایمر و پروب بلد بودم اما همیشه انالیز داده ها برام گنک و مبهم بود باید استادم کمک می کرد اما الان کاملا متوجه شدم ممنون ازتون خیلی به درد من خورد این دوره
ممنون از وقتی که می ذارید .🙏🏼❤️
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. سپاس از نظر شما.
آنالیز داده ها را می توان با نرم افزارهای مختلف به راحتی انجام داد بدون این که متوجه شد چه آنالیزی پشت آن وجود دارد. در این دوره سعی کردیم آنالیز پایه را ارایه دهیم و در اینصورت توانایی کار با هر نرم افزاری را خواهید داشت.
مینا شقاقی
بهترین دوره ریلتایمی که شرکت کردم، مدتها ریلتایم کار کردم بدون اینکه دقیق بفهمم آنالیزها چطوری با نرمافزارها انجام میشن چطور دیزاین میشن پرایمرها و پرپبها. صرفا فقط کاربر بودم انگار. بعد ازین دوره تازه فهمیدم خطایابی، طراحی و آنالیز ریلتایم یعنی چی
Zara_abbasi
سلام و احترام. من دانشجوی هلند در هستم و به توصیه یکی از دوستام شرکت کردم، اولش شک داشتم مطلب بدردبخوری به زبان فارسی و با این قسمت کم باشه، اما واقعا در نهایت بسیار راضی بودم از این دوره و بدون شک دوره شما یک سر و گردن از تمام دورههای انگلیسی که شرکت کردم بالاتر بود. لازم بود بنویسم که کاری که باارزشه دیده بشه. امیدوارم همینطور ادامه بدید.
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. بسیار عالی. خرسندیم ار رضایت شما.
n3gin_hkپژوهشگر
با سلام.
میخواستم بپرسم ویدیوی حل تمرین از حدود دقیقه ی 17 صدا ندارد یا مشکل از پلیر است؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود.
خود ویدیو صدا ندارد چون مشابه آن در ویدیوی دوره وجود دارد و صدای مدرس روی آن نیست. بخش نخست در دوره آموزشی وجود ندارد و برای فهم بهتر صدا دارد.
Niloofarپژوهشگر
فقط میتونم بگم بی نظیر بود
یک هزارم مطالب این دوره رو تو هیچ دانشگاهی تدریس نمیکنن.
ممنونم ازتون
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. بسیار خرسندیم که رضایت شما همراه عزیز را داریم. برای ما انرژی بخش هستید.
Monavvar Andarvaپژوهشگر
عالییی، تا اینجا که عالییی بود. این ویدیو های آموزشی تا چند وقت در حساب کاربری ما قابل دسترس خواهد بود؟ ممنون
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. سپاس از نظر شما. دست کم تا سه ماه. آکادمی قاصدک دسترسی شما را محدود نخواهد کرد ولی شرایط بین المللی قابل پیش بینی نیست.
یاسمن
خیلی دوره خوبی بود! از خانم دکتر بسیار ممنونم. من آفلاین مشاهده کردم، در کنار اسلایدهای بسیار قشنگ و مطلب منسجم که کاملا جامع بود و خیلی قشنگ ارایه شد، کیفیت فایل ویدیویی هم بسیار بالا بود. من دانشجوی دکترا در آمریکا هستم و بدون شک این بهترین آموزشی بود که دیده بودم. واقعا شما بینظیرید. امیدوارم همینطور ادامه بدید.
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. سپاس فراوان
karimirafsanjan.1373پژوهشگر
فیلم این دوره در اختیارمون قرار میگیره؟
چون من کارمند هستم شاید تواون روزی که این دوره برگزار میشه نتونم شرکت کنم و سرکار باشم و دوست ندارم این دوره اموزشی خوب و عالی رو از دست بدم.
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. به محض ثبت نام در دوره، شما به ویدیوی دوره و سایر منابع آن از طریق حساب کاربری (دوره های من) خود برای دست کم سه ماه دسترسی دارید. کیفیت و سرعت پخش بسیار عالی است و از طریق سرورهای ویژه پخش فایلهای ویدیویی صورت می گیرد.
پس از ورود به بخش دوره های من بروید و روی دوره کلیک نمایید، در صفحه دوره به بخش جلسات بروید و در آنجا جلسه های دوره و سایر منابع را مشاهده خواهید نمود و دسترسی خواهید داشت.
karimirafsanjan.1373پژوهشگر
سلام و وقت بخیر. این دوره آموزشی چه روزی و چه ساعتی برگزار میشه؟
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. به محض ثبت نام در دوره، شما به ویدیوی دوره و سایر منابع آن از طریق حساب کاربری (دوره های من) خود برای دست کم سه ماه دسترسی دارید.
مریمپژوهشگر
سلام. تخفیف اعمال کنید. ممنون
sara.asgharpour
مانلی جان و تمامی اعضای محترم آکادمی قاصدک طلایی سلام و خداقوت اساسی. من وبینار ریل تایم رو شرکت کردم و برای معرفی خودم باید بگم که سابقه سالها کار تحقیقاتی تو انستیتو پاستور ایران، بن یاخته و بهترین دانشگاه های آلمان از جمله هایدلبرگ رو دارم و الانم دانشجوی دکترای انستیتو هلمهلتز و دانشگاه مونیخ هستم که واقعا جزء بهترینهاست تو رشته ما توی آلمان. همه اینارو گفتم که بگم با وجود اینهمه سابقه کاری بینهایت استفاده کردم از وبینار شما. خودمو معرفی کردم که بگم چقدررررر سطح کار و اموزش شما متفاوت و بالاست و برای من از جهات مختلف آموزنده بود. واقعا ممنون ممنون و بازم ممنون. میخواستم بدونین که بینهایت باارزش و مفیده اینهمه وقتی که بی منت و بی توقع میذارین و اصلا قیمت نداره. واقعا نمیدونم چقدر انگیزه و هدف والایی پشت اینهمه تلاش و وقت گرانبهایی که گذاشتین هست و تصور اینهمه خوبی بیتوقعتون سخته. ممنون ممنون و بازم ممنون. امیدوارم چندین برابر اینهمه انرژی و محبتتون به خودتون برگرده اونم وقتی و جایی که توقعشو ندارین😊😘😍
قاصدک(پشتیبان علمی)
درود. بسیار خرسندیم از این که این دوره برای شما مفید بوده است. سپاس از نظرات ارزشمند و پر از لطف شما.